灰葡萄孢的分離方法
1、材料與方法
1.1實驗儀器
凈化工作臺, 恒溫培養箱, 顯微攝影儀等。
1.2生理試驗培養基
( 1) 巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒無碳源基礎培養基: NaNO 3 3g ; KH 2 PO 4 1g; KCl0. 5g ; MgSO 4 ?7H 2 O0. 5g ;FeSO 4 ?7H 2 O 0. 1 g; MnCl 2 ?4H 2 O 0. 08 g; 去離子水 1 L; 瓊脂 20 g; HCl 調節到 pH4。
( 2) 無氮源基礎培養基: 培養基( 1) 中的 3 g NaNO 3 改用 20 g 葡萄糖。
( 3) BC 培養基: 麥芽汁瓊脂與馬鈴薯汁葡萄糖瓊脂培養基等量混合。
( 4) 馬鈴薯汁葡萄糖瓊脂培養基( PDA) : 按常法制備。
以上培養基均在 121殺菌 20 min。
1.3生理試驗培養方法
在無碳源基礎培養基中分別加入各種碳源, 或在無氮源基礎培養基加入各種氮源的平皿中, 在溫度( 20- 2) 培養 10 d, 每天觀察菌體的生長狀態。
1-4 形態觀察方法在不同培養基的培養過程中, 觀察菌體發育狀況, 巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒并用顯微攝影儀拍攝菌體形態。
2、結果與討論
2.1灰葡萄孢生理特征
2.1.1碳源利用
實驗對象為 3 株灰葡萄孢, 編號分別為 BC1、 BC2 和 BC3, 將 3 株灰葡萄孢分別培養在加入不同碳源的無碳基礎培養基( 1) 的平皿上, 結果發現 3 株菌具有不同的生理特征。其中菌株 BC2 能夠利用的碳源種類較多, 巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒在同樣培養條件下的生長優勢也很明顯。BC2除了不能同化 D- 甘露糖之外, 對表 2 中所列出碳源都能在不同的程度上加以利用。這 3 株灰葡萄孢都能很好地利用葡萄糖、 果酸、 酒石酸、 檸檬酸和蘋果酸。對于它們來說, 這幾種碳源的優劣次序為酒石酸> 蘋果酸> 檸檬酸> 葡萄糖> 果糖。這種優先利用有機酸的情況是灰葡萄孢的重要特征。這 3 株菌均不能利用甘露糖, 對于淀粉和其他它糖類的利用能力也很差。
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