大鼠原代氣管上皮原代細胞
細胞培養操作：
收貨處理取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
商品屬性：
規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3406 |
種屬來源 | 大鼠 | 組織來源 | 氣管 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態特征 | 上皮細胞樣 |
形態：上皮細胞樣
培養基：大鼠氣管上皮細胞專用培養基
培養環境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內狀態
細胞基本屬性：
種屬來源：大鼠
組織來源：氣管氣管
生長特性：貼壁生長
產品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%胰蛋bai酶
產品貨期：4周左右
運輸方式：T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹：:大鼠氣管上皮細胞采用鏈霉蛋bai酶-中性蛋bai酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來。氣管以軟骨、肌肉、結締組織和粘膜構成。軟骨為"C"字形的軟骨環，缺口向后，各軟骨環以韌帶連接起來，環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續張開狀態。在近端下呼吸道的上皮表面，主要是纖毛上皮細胞，它與基底細胞及杯狀細胞一起構成假復層上皮，到達氣管腔表面的大部分細胞為纖毛上皮細胞，基底細胞與基底膜相連，通過半橋粒固定于上皮，在遠端下呼吸道中，Clara細胞和基底細胞占優勢，纖毛細胞已不存在，杯狀細胞數量減少，上皮形態更象柱狀，整個上皮存在于一薄層基底膜上，通過間質結締組織組成的網狀層相互支撐，上皮下存在其它的結締組織和纖維細胞。
原代細胞培養的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計數?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數。
五、?按30萬/毫升分瓶培養?：將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養。
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